蛋白檢測類的免疫層析法定性檢測試劑，技術要求附錄的企業參考品制備中企業參考品是否需要附具體濃度值？

來聊聊蛋白檢測類免疫層析法定性試劑注冊中的一個具體問題：在準備技術要求附錄里的企業參考品時，到底需不需要把參考品的具體濃度值給附上？這個問題看似細節，但在注冊申報和產品質量控制中非常關鍵。不同于病原體檢測試劑，蛋白類定性檢測對濃度的精密度要求更高，因為它直接關系到臨床判讀的“陽性”和“陰性”結果是否準確可靠。網上對這個問題的討論也不少，核心都聚焦在法規要求和實際操作的可行性上。接下來，我就結合相關法規和審評要求，把這個事情給大家梳理清楚。

企業參考品的作用與構成

企業參考品是啥？簡單說，就是企業自己制備的，用于在研發、生產和質量控制過程中驗證試劑性能的一套標準品。對于蛋白檢測類的免疫層析法定性試劑，這套參考品通常得包含幾個關鍵部分：陰性參考品、陽性參考品和特異性參考品。陰性參考品用來驗證試劑會不會把不該陽性的樣本錯判成陽性（也就是假陽性），它通常設置在臨界值附近一個比較低的濃度水平，專業上常叫C5濃度水平，意思是這個濃度下，理論上只有5%的檢測結果可能呈陽性。陽性參考品則是驗證試劑能不能把該陽性的樣本正確檢出（避免假陰性），它設置在臨界值附近一個比較高的濃度水平，叫C95濃度水平，意思是這個濃度下，理論上95%的檢測結果應該是陽性。特異性參考品呢，主要是看試劑會不會被其他可能存在于樣本里的物質干擾，導致結果不準。這三類參考品共同構成了評估試劑分析性能的基礎。

法規對濃度值的要求

那么核心問題來了，在準備這些參考品的技術要求附錄里，要不要寫明具體的濃度值呢？答案是：需要體現具體的濃度值。這個要求是有明確依據的。根據北京市藥品監督管理局發布的《免疫層析法檢測試劑（盒）產品技術審評規范（2017版）》，以及北京市藥監局在《北京市醫療器械審評檢查新300問》(中冊)里的官方解答，都明確指出：該類型檢測試劑（指蛋白檢測類的免疫層析法定性檢測試劑）不同于某些病原體檢測試劑，其企業參考品（包括陰性參考品、陽性參考品、特異性參考品等）在制備時，需要體現具體的濃度值。 為什么呢？因為蛋白檢測的定量屬性更強，其臨界值（Cut-off）的設置和驗證對濃度的依賴性極高。C5和C95濃度點本身就是圍繞臨界值定義的（臨界值減少一定濃度≈C5，增加一定濃度≈C95），它們定義了試劑的“檢測灰區”。只有明確了這些濃度值，才能科學地驗證試劑在臨界值附近的性能是否符合要求（例如，陰性參考品在C5濃度點的陰性符合率是否≥95%，陽性參考品在C95濃度點的陽性符合率是否≥95%）。 網上很多技術討論也強調了這一點，認為濃度值的明確是保證性能驗證可追溯、可重復的關鍵。

制備要求與信息呈現

明確了需要附濃度值，那具體怎么操作呢？首先，企業在配制這些參考品時，就要科學地確定目標濃度。陰性參考品的目標濃度應設在臨界值附近的C5水平，陽性參考品設在臨界值附近的C95水平。其次，在撰寫技術要求附錄的企業參考品部分時，應明確列出每種參考品（陰性、陽性、特異性）的具體目標濃度值（或濃度范圍，但需說明其與臨界值/C5/C95的關系）。 這里要注意，雖然要求體現濃度值，但根據《免疫層析法檢測試劑（盒）產品技術審評規范（2017版）》，技術要求本身對臨界值的具體濃度水平體現不作強制要求（這是為了適應當時企業研發水平的現狀），但這并不意味著企業參考品的濃度值可以模糊不清。 企業在研究資料中必須詳細說明參考品的配制過程、原料來源（如使用的標準物質、基質類型）、賦值方法（如何確定其濃度值）以及穩定性研究數據。如果參考品是企業自配的，這點尤其重要。 簡單說，附錄里需要寫清楚濃度值，背后的支撐數據（配制方法、賦值依據）則放在研究資料中。

總結

該類型檢測試劑不同于病原體檢測試劑，企業參考品一般包括陰性參考品（臨界值附近C5濃度水平）、陽性參考品（臨界值附近C95濃度水平）、特異性參考品等，需要體現具體的濃度值。企業在研制及注冊過程中可參考北京市藥品監督管理局發布的《免疫層析法檢測試劑（盒）產品技術審評規范（2017版）》。總而言之，對于蛋白檢測類的免疫層析法定性試劑，在技術要求附錄的企業參考品制備部分，明確列出陰性參考品（C5濃度水平）、陽性參考品（C95濃度水平）和特異性參考品的具體濃度值是法規和審評的明確要求。這直接關系到試劑在臨界值附近性能的科學驗證和有效評價。企業在操作時，務必依據《免疫層析法檢測試劑（盒）產品技術審評規范（2017版）》等指導文件，同時確保研究資料能充分支持參考品的配制和賦值過程。